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            ¶↕•∑     ×♥           →$<        ±γ☆∑      &n↕≈‌←bsp;      ₹÷±         小(xiǎo)鼠單克隆抗體(tǐ)Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒使用‍&(yòng)說(shuō)明(míng)書(shū)

貨号：6100

您好(hǎo)！感謝(xiè)您選擇了(le)我們的(de)産品，請(qǐng)≠∑您在讀(dú)完此說(shuō)明(míng)書(shū)後再開(kāi)始您的(→→♣↑de)實驗，這(zhè)對(duì)您順利完成實驗很(hěn)有(yǒu)幫助。

一(yī)、試劑原理(lǐ)：本試劑盒利用(yòng)雙抗體(tǐ)夾心法鑒定小(xiǎo)鼠淋巴細胞雜(↓'zá)交瘤培養上(shàng)清中單克隆抗體(tǐ)或特異親和(hé)純化(huà)單克隆抗體(tǐ)的(de)類和(hé)亞類（可(kě)區(qū)分(fēn)出IgG1\IgG2↑'≤®a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA）。采用(yòλ<&ng)小(xiǎo)鼠抗體(tǐ)共有(yǒu)位點的(de)二抗包 被微(wēi)孔闆，與加入的(de)培養上(shàng)清中的(de)小(xiǎo) ​↑鼠抗體(tǐ)結合，再加入HRP标記的(de≤↔♦ )抗小(xiǎo)鼠各類、亞類的(de)抗體(tǐ)來(lái)分(fēn)别反應， 随後用(yòng)TMB底物(wù)系統顯色并用(yòng)稀硫酸終止，再通(tōng)過酶标儀δ★✔檢測吸光(guāng)度來(lái)判斷被測單克隆抗體(tǐ)的(de)類或亞類。本 試劑盒具有(yǒu)極高(gāo)的(de)分(fēn)辨率，是(shì)您λ®Ω↔鑒定小(xiǎo)鼠單克隆抗體(tǐ)類、亞類的(de)可(kě∏δ)靠工(gōng)具。

二、試劑組份：

三、使用(yòng)範圍：用(yòng)于培養上(shàng)清中小(xiǎo)鼠單克Ω♥₹λ隆抗體(tǐ)Ig類、亞類的(de)鑒定以及相(xiàng)關內(nèi)容的(de)研究。 

四、使用(yòng)方法：

 1、首先将試劑盒恢複室溫（大(dà)約30分(fēn)），然≥∏γ後用(yòng)純水(shuǐ)把清洗液配成"™★工(gōng)作(zuò)濃度（一(yī)份濃縮清洗液加19份純水(shuǐ)）。

 2、取出酶标闆。每個(gè)标本需要(yào)6孔，陽性對(duì)←≠照(zhào)6孔，陰性對(duì)照(zhào)6孔。多(duō)餘的(d≠★ e)用(yòng)自(zì)封袋保存，記得(de)放(fàng)入λ ™₽幹燥劑。

 3、将标本檢測孔每孔先加入标本稀釋液各50μ ✔l。然後将50μl細胞培養上(shàng)清（或特異親和→ σ®(hé)純化(huà)的(de)抗體(tǐ)）再加Ωγ≤∑入酶标微(wēi)   孔闆，每個(gè)标本Ωλ‌加6孔；陽性對(duì)照(zhào)和(hé)陰性對(d±λ←uì)照(zhào)各6孔每孔100μl此處不(bù)加标本稀釋液。貼上(shàng)封闆膜37℃溫育30分(fēn)鐘'♦©β(zhōng)。

 4、棄去(qù)闆內(nèi)液體(tǐ)，手工(gōng)洗闆5遍後在不(bù)掉纖維的(de)吸水(shuǐ)材料上(shàng)拍(pāi)幹（或機(jī)洗5遍）。再在每個(gè)标本的(de)6孔中分(fēn)别加入6₹β£ 種 酶标二抗各100μl，通(tōng)用(yòng)陽性、陰性對(duì)照(zh∞δεβào)的(de)各孔也(yě)一(yī)樣。在加樣圖上(shàng)或酶标闆©α§§上(shàng)做(zuò)好(hǎo)标記。貼上(shàng)封闆≠≈★膜37℃溫育30分(fēn)鐘(zhōng)。

 5、吸棄闆內(nèi)液體(tǐ)，手工(gōng)洗闆5遍後在不(bù)掉纖維的(de)吸水(shuǐ)材料上(shàng)拍(pāi)幹（或機(jī)洗5遍）。每孔分(fēn)别加入顯色劑A和(h駙Ω)顯色劑B各50μl，換一(yī)張新的(de)封闆™≤膜貼闆避光(guāng)37℃顯色20分(fēn)鐘(zhōng)。

 6、本試劑盒特異性好(hǎo)一(yī)般肉眼即可(kě)觀察₹®出結果，看(kàn)顯色藍(lán)的(de)那(nà)個(gè)孔所對(duì)應的±♦σ(de)酶标二抗就(jiù)知(zhī)道(dào)此标本的(de)Ig類或亞類。更可(♠π<kě)将反應終止液（每孔50μl）終止反應後用(yòng)酶标儀450∑ nm測定波長(cháng)，630nm參考波長(cháng)雙波長(cháng)測定結果，參看(kàn)高(gāo)值孔所對(duì)應的(de)酶标二抗就(jiù)÷↓知(zhī)道(dào)此标本的(de)Ig類或亞類(<<♣陽性對(duì)照(zhào)OD一(yī)般不(bù)小(xiǎo)于0.8，陰性對(₹∏↓duì)照(zhào)一(yī)般不(bù)高(gāo ÷★β)于0.15，陽性判定标準：樣品OD大(dà)于陰性OD+0.15，陰性OD低(dī)于0.05按¶ 0.05算(suàn))。

五、産品特點：高(gāo)靈敏度、高(gāo)特異性、結‌λ←果容易判定。

六、保存條件(jiàn)：不(bù)開(kāi)啓2-8℃避光(guāng)保存效期一(yī)年(☆♥nián)。不(bù)正确存放(fàng)或過于頻(pín)繁開(kāi)啓使用(yòn∞₩±×g)有(yǒu)可(kě)能(néng)因此使效期縮短(duǎn)。

七、注意事(shì)項：

 1、雖然本試劑盒過期後很(hěn)久還(hái)有(yǒu)使用(™♣∞yòng)價值但(dàn)還(hái)是¥₽(shì)請(qǐng)您在有(yǒu)效期內(nèi)使用(yòng)。

 2、在檢測腹水(shuǐ)類單抗時(shí)要(y©  'ào)稀釋到(dào)1/5萬，雖然可( ♥kě)以分(fēn)辨但(dàn)并不(bù)建議(yì)您這(zhè)樣做(zuò£→)。此類樣品成分(fēn)十分(fēn)複雜(zá)，有(yǒu)幹擾結果的(de)可(£π ↔kě)能(néng)。在此種情況下(xià)您可(k춶±)以選擇本公司的(de)貨号為(wèi)6102的(de)鑒定試劑。它會(huì)給您帶來(lái)滿意的(de)結果,同λ®&¥時(shí)您也(yě)可(kě)以使用(yòng×€ )抗原包被闆替換試劑盒內(nèi)的(de)包被闆來(lái)解決此類問(wènΩ♥™÷)題，但(dàn)這(zhè)種情況下(xià)陽性對(duì•₩±×)照(zhào)不(bù)顯色屬于正常。

 3、手洗闆子(zǐ)時(shí)一(yī)定要(yào)把孔加滿，停留10秒(miǎo₩↑λ♠)然後棄盡，甩幹淨。特别是(shì)在酶标二抗溫育後洗闆時(shí)一(yī)定要(yào)把酶吸出而不(b​÷Ωù)是(shì)甩出，要(yào)吸淨。這(zhè)個(gè)在手工(gōng)洗闆•©£∑時(shí)對(duì)結果很(hěn)重要(y≤πào)。

 4、一(yī)次沒用(yòng)完的(de)闆子(zǐ)要(yào)帶幹燥劑放(fàng)βδ♥自(zì)封袋封好(hǎo)，随盒存放(fàng)。

 5、拿(ná)放(fàng)闆子(zǐ)時(shí)不(bùλ✘↔)要(yào)劇(jù)烈抖動，以免孔間(jiān)交叉污染出₹π 現(xiàn)錯(cuò)誤結果。

 6、本試劑一(yī)般不(bù)會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)陽性，但☆&$(dàn)出現(xiàn)兩個(gè)陽性的★✘ &(de)現(xiàn)象現(xiàn)實中是(©¶§shì)真實存在的(de)，一(yī)般會(huì)一(yī)個(gè)O↓☆D很(hěn)高(gāo),另一(yī)個(gè)很(hěn)低(dī)但(dàn)×$₩ 卻還(hái)能(néng)判為(wèi)陽性，實驗分(fēn)析表明(míngαγ)這(zhè)種情況下(xià)以OD高(gāo)值孔為(wèi)準，出現(xià∑←'n)這(zhè)種情況有(yǒu)多(duō)重β×★×原因：A、培養的(de)細胞中有(yǒu)“飼養細胞”殘留，B、由于單抗研制(zhì)存©≥在人(rén)工(gōng)幹預步驟因此抗體(tǐ)本身(shēn)有(yǒu∑ ‌)可(kě)能(néng)會(huì)存在亞類結構上(shàng)的(de)輕微(wē←λ☆i)變異，    C、樣品為(wèi)非特異親和(hé)純化(huà)的(de)抗體(tǐ)或®₹α樣品是(shì)腹水(shuǐ)，D、上(shàng÷×)清出現(xiàn)少(shǎo)量污染，E、實驗操作(zuò)粗放(f<<₽✔àng)，F、加錯(cuò)試劑。

特别提示：不(bù)具備ELISA基礎知(zhī)識和(hé)操作(zuò)的(de)人(rén)員(yuán)不(b¥λγù)要(yào)完成此實驗或類似實驗，因為(wèi)這(zhè)可(kě)能(n♣₩éng)會(huì)給您帶來(lái)錯(cuò)誤的(de)結果和(hé)不(bù)必要(yà♣εo)的(de)損失，實驗中有(yǒu)疑問(wèn)請(qǐng)聯系我們技(jì)術(shù)團隊BIOABLAB@163.COM

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