佐 劑

一(yī)、佐劑的(de)定義

免疫佐劑(immunoadjuvant)：是(shì)一(yī)類非特異性免疫增強劑，先于抗原或與抗原混合同時(sh↑Ω☆í)注入動物(wù)體(tǐ)內(nèi)，能(nén € ₩g)非特異性地(dì)增強機(jī)體(tǐ)對(duì)該抗原的(de)免疫應答(£®dá)或改變免疫應答(dá)類型的(de)物(wù)質，簡稱佐劑(adjuvant)。佐劑廣泛應用(yòng)于人(rén)工(gōng)主動免疫和(hé)疫苗研制(zhì)中，通(t​Ω÷₹ōng)過加入佐劑可(kě)以減少(sh&'ǎo)抗原用(yòng)量和(hé)接種次數(shù)。

二、佐劑的(de)作(zuò)用(yòng)

免疫佐劑能(néng)使非特異性加強或修飾與其共同注入體(tǐ)內(nèi)的(d©←♥e)抗原的(de)免疫應答(dá)，與僅用(yòng)抗原免疫相(xiàng)比♣πσ，使用(yòng)佐劑能(néng)增大(dà)抗體(tǐ)産量，許多(duō)機(jī)制π ×(zhì)能(néng)夠參與到(dào)佐劑介♣ ♠導的(de)放(fàng)大(dà)效應中，佐劑的("←de)作(zuò)用(yòng)機(jī)制(zhì)有(yǒ×Ωu)：① 刺激先天性免疫應答(dá)，有(yǒu)助于抗原特異性B細胞和(hé)T細胞的(de)活化(huà)；② 在接種部位形成抗原儲存庫，使抗原緩慢(m∞☆àn)釋放(fàng)，延長(cháng)抗™β♥原在局部組織內(nèi)的(de)滞留時(shí)間(jiān)，使抗原與免疫細胞較長 ♠(cháng)時(shí)間(jiān)接觸并激發對(duì)抗原的(de)應答(dá)；>φ∑③ 增加抗原表面積，提高(gāo)抗原的(de)免疫原性，輔助抗原暴≠ ♥露并将能(néng)刺激特異性免疫應答(dá)的(de§α≈ε)抗原表位提呈給免疫細胞；④ 促進局部的(de)炎症反應，增強吞噬細胞的(de)活性，促進免疫細胞的(de§∑₽$)增值和(hé)分(fēn)化(huà)，誘導和(hé)促進細胞因子(zǐ)的(de)分(§¥→fēn)泌。⑤增強抗原的(de)免疫原性，使無免疫原性或僅有(yǒ♠≥‍‌u)微(wēi)弱免疫原性的(de)物(wù)質變成有(yǒ• ≥u)效的(de)免疫原；⑥增強機(jī)體(tǐ)對(duì)抗原刺激的(de)反應性，提高(gāo)初次≤± 免疫應答(dá)和(hé)再次免疫應答(dá)所産生Ω←(shēng)的(de)的(de)抗體(tǐ)水(s♦→≤αhuǐ)平；⑦改變抗體(tǐ)的(de)産生(shēng)類型，使↓<<λ由産生(shēng)IgM轉變為(wèi)産生(shēng)IgG；⑧誘導遲發型反應，增強機(jī)體(tǐ)的(de)細胞免疫應答(d→δφá)。

三、佐劑的(de)選擇

(1)與單獨使用(yòng)抗原相(xiàng)比，佐劑與抗原聯用←α(yòng)能(néng)刺激機(jī)體(tǐ)産↔ε↑生(shēng)較強的(de)免疫反應。

(2)能(néng)夠激活強的(de)體(tǐ)液和(hé)T細胞免疫應答(dá)。

(3)能(néng)夠遞送更好(hǎo)的(de)免疫記憶或長(cháng)期免疫。

(4)在寬範圍的(de)時(shí)間(jiān)、儲存、溫度和(hé)pH下(xià)質量保持穩定。并且易于處理(lǐ)和(hé)儲存。

(5)安全無毒性：不(bù)含雜(zá)質或有(yǒu)害物(wù)©×$質，通(tōng)過肌肉、皮下(xià)、靜(j←∑α∏ìng)脈、腹腔等各種途徑進入動物(wù)體(tǐ)後無∞♣∏毒副作(zuò)用(yòng)，産品安全有(yǒu)效。

(6)生(shēng)物(wù)相(xiàng)容性好(hǎo)：佐劑應具有(yǒu)良™↕$好(hǎo)的(de)生(shēng)物(wù)相(xiàng)容性，不(bù)會(h♦®€uì)引起過敏或其他(tā)不(bù)良反應。

(7)價格低(dī)廉。

(8)使用(yòng)方便。

(9)批間(jiān)差異小(xiǎo)。

四、佐劑的(de)種類

佐劑的(de)種類有(yǒu)很(hěn)多(duō)，一(yī)般↓±>可(kě)分(fēn)為(wèi)以下(xià)幾類：①無機(jī)佐劑：如(rú)氫氧化(huà)鋁、明(míng)礬等。②有(yǒu)機(jī)佐劑：如(rú)分(fēn)≠✘$枝杆菌、短(duǎn)小(xiǎo)棒狀杆菌、百日(rì)咳杆菌、某些(xiē♣ε)細胞因子(zǐ)等。③合成佐劑：包括人(rén)工(gōng)合成的(de)雙鏈多(duō)聚核苷酸，如(rú)雙鏈多✔‍(duō)聚肌苷酸和(hé)雙鏈多(duō)聚腺苷酸等。④油劑：如(rú)弗氏佐劑、礦物(wù)油、植物(w ↓γù)油等。⑤藥物(wù)類佐劑及一(yī)些(xiē)新型佐劑。

五、佐劑産品推薦

在所有(yǒu)的(de)佐劑中，油包水(shuǐ)乳劑是(s↕↑✔δhì)認識和(hé)使用(yòng)廣泛的(de)佐劑，是(shì)由Freund先研制(zhì)出來(lái)的(de)，廣泛地(dì)用(yòng)于與抗原聯合使用(yòng₩<© )以刺激高(gāo)滴度抗血清的(de)産生(shēn±✔≠​g)。弗氏佐劑(Freunds Adjuvant)是(shì)目前動物(wù)實驗中常用(yòng)的(de)油包水(shuǐ)免疫佐劑之一(yī)，常用(yòng)于動物(wù)免疫制(zhì)備抗體(tǐ)。±♠φ分(fēn)為(wèi)不(bù)完全弗氏佐劑‍‌‍™(IFA)和(hé)完全弗氏佐劑(CFA)，弗氏完全佐劑由礦物(wù)油、乳化(huà)劑和(h→‍ε'é)結核分(fēn)枝杆菌組成，弗氏不(bù)完γ‌φ•全佐劑與弗氏完全佐劑一(yī)樣，隻是(shì)不(bù)含有(yǒ☆±u)結核分(fēn)枝杆菌成分(fēn)。弗氏佐劑在應用(yòng)過程中，可(kě)導緻肉芽腫、無菌性®±€膿腫以及潰瘍的(de)産生(shēng)，弗氏完全佐劑增強免疫反應的(∑✘•♥de)能(néng)力相(xiàng)對(duì)不(bù)完全佐劑更強，所以在大(dà)多(duō)數(shù)實驗方案中，隻在初次免疫時(shí)使用(yòng)完全弗氏佐劑(CFA)，随後的(de)接種則使用(yòng)不(bù)完全弗氏佐劑(IFA)。

洛陽佰盛生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)有(yǒu)ε™©限公司自(zì)主研發的(de)佐劑系列産品：(乳化(huà)型)快(kuài)速不(bù)完全免疫佐劑、(乳化(huà)型)快(kuài)速完全免疫佐劑、(乳化(huà)型)快(kuài)速免疫佐劑套裝、弗氏不(bù)完全免疫佐劑(加強型)、弗氏完全免疫佐劑(加強型)、小(xiǎo)鼠單抗腹水(shuǐ)制(z✘₩↔hì)備專用(yòng)佐劑套裝、弗氏免疫佐劑套裝(加強型)，這(zhè)些(xiē)佐劑産品具有(yǒu)穩定性高(gāo)、無毒副作(zuò)用(yòn₹↑★g)、批間(jiān)差異小(xiǎo)、生(shēng→©)物(wù)相(xiàng)容性好(hǎo)、使用(yò σ×ng)方便、價格低(dī)廉等優勢，被廣大(dà)客✔ε戶認可(kě)和(hé)青睐。特别适合單抗研發用(yòng)小(xiǎo)‌≠鼠的(de)免疫以及兔子(zǐ)、山(shān)羊、豚鼠等多(duō)克隆抗血清&∏的(de)制(zhì)備。

六、佐劑使用(yòng)方法

在免疫動物(wù)前，先将佐劑與抗原按一(yī)定比例混合，制(zhì)備成“油包水(shuǐ)”乳狀液。可(kě)溶性抗原和(hé)佐劑在乳化(huà)過程中，含有(yǒu)抗原的(de)小(↓γxiǎo)水(shuǐ)滴被油所捕獲，在非常黏的(de)乳劑中 σ形成顆粒，傳統的(de)乳化(huà)方法有(yǒu)研磨法、注射器(qì)∑✘π混合法、超聲法。這(zhè)些(xiē)方法不(bù)僅抗原損耗大 ★↕‌(dà)、用(yòng)時(shí)長(cháng)，而且乳化(huà)過程費(fèi€®€÷)力不(bù)易操作(zuò)。為(wèi)解決這(zhè)些(xiē)難題，洛陽佰盛生(↑$shēng)物(wù)技(jì)術(sh↓☆ù)有(yǒu)限公司研發出了(le)一(yī)種簡單高(gā§•ασo)效的(de)乳化(huà)方法，彌補了♣♥↕(le)傳統乳化(huà)方法的(de)各種不(bù)足。

采用(yòng)洛陽佰盛生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)有(yǒu)限公司自(zì)主研發的(de)手持移液器(qì)式佐劑乳化(huà)器(qì)進行(€¥xíng)乳化(huà)，乳化(huà)過程操作(zuò)₹ ≠♦簡單、方便快(kuài)捷、安全性高(gāo)、用(yòn≤λg)時(shí)少(shǎo)，幾分(fēn)鐘(zhōng)就(jiù)可←€☆(kě)乳化(huà)完全，且抗原幾乎無損耗。乳化(huà)器(qì)如(rú)下(xià)圖：

乳化(huà)具體(tǐ)操作(zuò)方法有(yǒu)2種：(1)将佐劑先加入乳化(huà)管，然後加少(shǎo)部 ¶β¥分(fēn)抗原攪拌乳化(huà)幾下(xià)後再加抗原繼續乳Ω♥∑化(huà)，直到(dào)抗原加完再乳化(huà)幾分(fēn)↓♣♦≥鐘(zhōng)即可(kě)。(2)抗原和(hé)佐劑加入乳化(huà)管，稍等抗原₽‌ <會(huì)沉入底部和(hé)佐劑分(fēn)層，用(yòng)攪£σ↑拌器(qì)自(zì)上(shàng)而下(xià)慢(màn)慢≠​§÷(màn)攪拌佐劑入抗原層，慢(màn)慢(màn)下(xià)≤™移這(zhè)時(shí)會(huì)發現(xiàn)混合液很(hěn)₽∞ §快(kuài)乳白(bái)越來(lái)越粘，幾分(fēn)鐘(zh£♠±$ōng)就(jiù)可(kě)完成。

乳化(huà)具體(tǐ)操作(zuò)方法有(yǒu)2種：(1)将佐劑先加入乳化(huà)管，然後加少(​♥shǎo)部分(fēn)抗原攪拌乳化(huà ≈∏♥)幾下(xià)後再加抗原繼續乳化(huà)，直到(dào)抗原加完再乳化(huà≈∑$)幾分(fēn)鐘(zhōng)即可(kě)。(2)抗原和(hé)佐劑加入乳化(huà)管，稍等抗原會(huì)沉入底部和(hé&γ)佐劑分(fēn)層，用(yòng)攪拌♠±♦✘器(qì)自(zì)上(shàng)而下(xià)慢≤♣(màn)慢(màn)攪拌佐劑入抗原層，✘₽"慢(màn)慢(màn)下(xià)移這(zhè)時(≠♣shí)會(huì)發現(xiàn)混合液很(hě↑¶n)快(kuài)乳白(bái)越來(lái)越粘，幾分(fēn)鐘(zhōng)就(✔£™jiù)可(kě)完成。

乳化(huà)完成後，将一(yī)滴乳劑滴入水(shuǐ)中，若保持完整不(bù)分(fēn)散，成滴狀浮σ♥‍€于水(shuǐ)面，則為(wèi)乳化(huà)完全，為(wèi)合格的✘<(de)油包水(shuǐ)劑。各成分(fēn)在乳化(huà<↕)後不(bù)會(huì)分(fēn)散，在運用¶ ¥(yòng)到(dào)宿主組織後，才能(néng)發揮抗原倉庫的(de)作(zuò)用(yòn¶πg)。下(xià)圖是(shì)我公司制(zhì)備的(de)佐劑與抗原乳化(hα§♦uà)完成效果

實驗表明(míng)我公司制(zhì)備的(de)佐劑較好(hǎo)的ו(de)使用(yòng)比例是(shì)30-50%。接近(jìn)30%乳化(huà)粘度增加，接近(jìn)50%乳化(huà)粘度減小(xiǎo)。因此建議(yì)夏季使用(yòng)低(dī)濃度冬季使用₽'•(yòng)高(gāo)濃度乳化(huà)；這(zhè)樣既能(néng)得(d§®‍e)到(dào)很(hěn)好(hǎo)的(de)免疫效✔£果也(yě)能(néng)減少(shǎo)注射時(shí)帶來♣♥§←(lái)的(de)阻力困難。

七、佐劑使用(yòng)注意事(shì)項

(1) 用(yòng)于生(shēng)産抗血清的(de)佐劑進入機(jī)體(tǐ)組織後會(huì)✘♣ε∏引起非常強的(de)炎症反應，因此在使用(yòng)這(zhè)些(x÷₽€βiē)試劑時(shí)需要(yào)佩戴手套♦σ∞。

(2) 佐劑是(shì)以無菌形式出售的(de)，因此操作(zuò)過程盡量清潔，佐劑一(yī)旦 ©污染，應丢棄。

(3) 過量佐劑可(kě)導緻免疫抑制(zhì)，從(cóng)而引起抗體(tǐ)産出低(dī)，因此，佐☆φ 劑使用(yòng)量應為(wèi)或

接近(jìn)公司建議(yì)的(de)劑量α λ。

(4) 對(duì)于多(duō)肽抗原或其他(tā)免疫原性較弱的δ≠₽♠(de)抗原，可(kě)将它們與一(yī)✔¥輔助蛋白(bái)共價偶聯，比如(rú)BSA、OVA，然後再與佐劑混合。

(5) 高(gāo)滴度的(de)抗體(tǐ)通(tσ©↕λōng)常經低(dī)劑量多(duō)次抗原免疫後産生(shēng)，而非一(yī)次大(dà)劑✘ ↕量免疫。

八、公司介紹

洛陽佰盛生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)有(y §£ǒu)限公司位于十三朝古都(dōu)、牡丹花(huāπλ)城(chéng)、中國(guó)曆史文(wén ® ε)化(huà)名城(chéng)洛陽市(s∏ hì)。主要(yào)從(cóng)事(shì)生(shēn≠♥∏g)物(wù)診斷技(jì)術(shù)與材料的(de)研發、技(jα§←ì)術(shù)服務與技(jì)術(shù)轉讓；πε相(xiàng)關技(jì)術(shù)與材料的(de)應用(yòn♣↑↔÷g)範圍涵蓋食品安全檢測、動物(wù)疾病診斷、人(rén)類疾病診斷、抗體(tǐ)制(​♣zhì)備、細胞培養、疫情防控及生(shēng)命科(kē)學儀器(qì)等。客÷↕δ戶主要(yào)包括大(dà)學(食品科(kē)學院系、生(shēng)物(w&☆ù)技(jì)術(shù)院系、醫(yī)學院系)、科(kē)研機(jī)構、食品安全診斷試劑公司、動✔§$物(wù)疾病診斷試劑公司、人(rén)類疾病診斷試劑公司。做(zuò)好(hǎo)基礎研發，助→✘力祖國(guó)科(kē)研是(shì)我們的(de)主要(yào)目标。目前公司擁有(yǒu)→$π或授權使用(yòng)的(de)商标有(yǒu)BIOABLAB\ABLAB。